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In allen konventionellen lichtmikroskopischen Beleuchtungstechniken ist das Auflösungsvermögen von zwei Parametern abhängig, der Wellenlänge des verwendeten Lichtes und der numerischen Apertur des jeweiligen Objektivs. Bei einer numerischen Apertur von 1,40 lässt sich ein Auflösungsvermögen von etwa 0,20 µm erreichen, wenn eine Beleuchtung im monochromatischem Grünlicht durchgeführt wird (Wellenlänge 550 Nanometer, Abb. 1). Dieser Wert kann als üblicher Grenzwert des lichtmikroskopischen Auflösungsvermögens betrachtet werden. Submikroskopische Strukturen, welcher kleiner als 0,20 µm sind, können üblicherweise nur in der Fluoreszenzmikroskopie lichtmikroskopisch sichtbar gemacht werden.
Die Tiefenschärfe eines lichtmikroskopischen Bildes ist von der jeweiligen Vergrößerung und der numerischen Apertur abhängig (Abb. 2). Bei gleichbleibender Vergrößerung nimmt die Tiefenschärfe mit zunehmender numerischer Apertur ab.
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